液相色譜柱使用注意事項(xiàng)
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色譜柱在使用前廣泛認同,進(jìn)行柱的性能測(cè)試國際要求,并將結(jié)果保存起來,作為今后評(píng)價(jià)柱性能變化的參考鍛造。但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品競爭激烈、流動(dòng)相、柱溫等條件的差異而有所不同改善;另外空白區,在做柱性能測(cè)試時(shí)是按照色譜柱出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行(出廠測(cè)試所使用的條件是佳條件),只有這樣,測(cè)得的結(jié)果才有可比性形勢。
1實踐者、樣品的前處理:
a、使用流動(dòng)相溶解樣品約定管轄。
b數據、使用予處理柱除去樣品中的強(qiáng)性或與柱填料產(chǎn)生不可逆吸附的雜質(zhì)。
c業務指導、使用0.45µm的過濾膜過濾除去微粒雜質(zhì)改進措施。
2、流動(dòng)相的配制:
液相色譜是樣品組分在柱填料與流動(dòng)相之間質(zhì)量交換而達(dá)到分離的目的長足發展,因此要求流動(dòng)相具備以下的點(diǎn):
a今年、流動(dòng)相對(duì)樣品具有一定的溶解能力,保證樣品組分不會(huì)沉淀在柱中(或長時(shí)間保留在柱中)結構不合理。
b動手能力、流動(dòng)相具有一定惰性,與樣品不產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)(殊情況除外)意見征詢。
c提升、流動(dòng)相的黏度要盡量小,以便在使用較長的分析柱時(shí)能得到好的分離效果等多個領域;同時(shí)降低柱壓降再獲,延長液體泵的使用壽命(可運(yùn)用提高溫度的方法降低流動(dòng)相的黏度)。
d應用擴展、流動(dòng)相的物化性質(zhì)要與使用的檢測(cè)器相適應(yīng)體驗區。如使用UV檢測(cè)器,使用對(duì)紫外吸收較低的溶劑配制活動上。
e有望、流動(dòng)相沸點(diǎn)不要太低,否則容易產(chǎn)生氣泡導向作用,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)無法進(jìn)行方案。
f、在流動(dòng)相配制好后十大行動,一定要進(jìn)行脫氣左右。除去溶解在流動(dòng)相中的微量氣體既有利于檢測(cè),還可以防止流動(dòng)相中的微量氧與樣品發(fā)生作用特性。
3傳承、流動(dòng)相流速的選擇:
因柱效是柱中流動(dòng)相線性流速的函數(shù),使用不同的流速可得到不同的柱效建言直達。對(duì)于一根定的色譜柱,要追求佳柱效,使用佳流速充分發揮。對(duì)內(nèi)徑為4.6mm的色譜柱發展成就,流速一般選擇1ml/min,對(duì)于內(nèi)徑為4.0mm柱重要方式,流速0.8ml/min為佳開展面對面。
當(dāng)選用佳流速時(shí),分析時(shí)間可能延長非常重要∵M一步提升?刹捎酶淖兞鲃?dòng)相的洗滌強(qiáng)度的方法以縮短分析時(shí)間(如使用反相柱時(shí),可適當(dāng)增加甲醇或乙腈的含量)營造一處。
注意:
a.由于甲醇廉價(jià)改革創新,對(duì)于反相柱推薦使用甲醇體系(必須使用乙腈的場合除外)。
b.對(duì)于正相柱推薦使用沸程為30-60℃的石油醚或提后的己烷作流動(dòng)相取得顯著成效,沒有提的己烷不得使用新模式。用水使用超水(電阻率大于18兆歐),去離子水及雙蒸水中含有酚類雜質(zhì)規劃,有可能影響分析結(jié)果提高。
c.含水流動(dòng)相*在實(shí)驗(yàn)前配制,尤其是夏天使用緩沖溶液作為流動(dòng)相不要隔夜進入當下。加入*紮實,防止細(xì)菌生長。
d.流動(dòng)相要求使用0.45 µm濾膜過濾新體系,除去微粒雜質(zhì)投入力度。
e.使用HPLC級(jí)溶劑配制流動(dòng)相,使用合適的流動(dòng)相可延長色譜柱的使用壽命長效機製,提高柱性能
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