液相色譜柱由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)倍增效應、接頭、螺絲等組成製造業。在日常分離分析工作中優化服務策略,色譜柱的正確使用和維護(hù)十分重要,色譜柱使用是否得當(dāng)發展基礎,直接影響色譜柱的壽命兩個角度入手,稍有不慎就會(huì)降低柱效、縮短使用壽命甚損壞顯示。那么我們要如何選擇呢創新為先?
1真正做到、填料基質(zhì)
a.硅膠基質(zhì):度高本錢低科普活動,強(qiáng)度大,化學(xué)修飾輕易強化意識,但pH值范圍有限長期間。大多硅膠基質(zhì)填料在pH2-8之間穩(wěn)定,但經(jīng)過殊修飾的硅膠鍵合相可以穩(wěn)定在pH1.5-10現場。
b.聚合物基質(zhì):應(yīng)用pH值范圍寬高端化,溫度穩(wěn)定(高溫可以達(dá)到80度以上),機(jī)械強(qiáng)度小我有所應。
2提單產、顆粒外形
大多現(xiàn)代HPLC填料都是球形顆粒,但有時(shí)是不規(guī)則的顆粒至關重要。球形顆粒提供較低的柱壓發展空間、較高的柱效和穩(wěn)定性以及較長(zhǎng)的柱壽命在使用高粘度的活動(dòng)相時(shí)效果;不規(guī)則顆粒有較大比表面積和相對(duì)低廉的價(jià)格。
3解決、顆粒粒徑
粒徑越小柱效越高預期、分離度越高,但同時(shí)會(huì)導(dǎo)致較高柱壓降幅度。選擇1.5-3μm的填料以解決一些復(fù)雜樣品,UPLC可以使用1.5μm的填料結構;另外10μm或更大粒徑的填料用作半制備或制備柱。
4貢獻、含碳量
含碳量指的是硅膠表面鍵合相的比例規模最大,與比表面積和鍵合覆蓋度等有關(guān)。高含碳量進(jìn)步柱容量防控、分辨率及分析時(shí)間成效與經驗,用于要求高分離度的復(fù)雜樣品;低含碳量分析時(shí)間短堅實基礎、展現(xiàn)不同的選擇性稍有不慎,用于快速分析簡(jiǎn)單樣品及需要高含水活動(dòng)相條件的樣品。一般C18的含碳量在7-19%不等等地。
5最為顯著、孔徑和比表面積
HPLC吸附介質(zhì)是多孔的顆粒,盡大多數(shù)的反應(yīng)表面于孔內(nèi)規定。因此環境,分子必須進(jìn)進(jìn)孔內(nèi)才能被吸附和分離。
孔徑和比表面積是相輔相成的兩個(gè)概念高質量∠鄬啽??讖叫”缺砻娣e大,反之亦然流程。比表面積大合作,增加樣品與鍵合相之間的反應(yīng),增加保存,上樣量和復(fù)雜成分的分離度助力各業;比表面積小極致用戶體驗,平衡時(shí)間快,適合梯度分析應用。
6建議、孔容和機(jī)械強(qiáng)度
孔容,又稱“孔體積”相貫通。指單位顆粒的空隙體積大小不斷發展。它能很好的反應(yīng)填料的機(jī)械強(qiáng)度⌒v活動?左w積大的填料相對(duì)孔體積小的填料機(jī)械強(qiáng)度要略弱不斷進步∽灾餮邪l?左w積為1.5mL/g或更小的填料大多用于HPLC分離,而孔體積大于1.5mL/g的填料使用于尺寸排阻色譜和低壓色譜更加廣闊。
7損耗、封端封端
封端能夠降低性堿性化合物由于與裸露的硅醇基相互作用而產(chǎn)生的拖尾峰。不封端鍵合相相對(duì)封端鍵合相會(huì)產(chǎn)生不同的選擇性非常完善,尤其是性樣品性能穩定。