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講述安捷倫液相色譜儀的梯度洗脫
更新時間:2018-07-21
技術文章
講述
安捷倫液相色譜儀
的梯度洗脫
安捷倫液相色譜儀根據(jù)固定相是液體或是固體引領,又分為液-液色譜(LLC)及液-固色譜(LSC)∮兴黾?,F(xiàn)代液色相譜儀由高壓輸液泵姿勢、進樣系統(tǒng)敢於挑戰、溫度控制系統(tǒng)不斷創新、色譜柱建立和完善、檢測器、信號記錄系統(tǒng)等部分組成參與水平。與經(jīng)典液相柱色譜裝置比較大型,具有、快速明確相關要求、靈敏等點重要意義。對高沸點、難氣化合物的混合物通過色譜柱和淋洗劑并以實現(xiàn)分離深化涉外。應用于生物化學追求卓越、生物醫(yī)學、環(huán)境化學參與能力、石油化工等部門合理需求。
安捷倫液相色譜儀的梯度洗脫有兩種方式:低壓梯度(外梯度)和高壓梯度(內梯度);
兩種溶劑組成的梯度洗脫可按任意程度混合充分發揮,即有多種洗脫曲線:線性梯度高效、凹形梯度、凸形梯度和階梯形梯度提高。線性梯度常用機構,尤其適合于在反相柱上進行梯度洗脫。在進行梯度洗脫時交流,由于多種溶劑混合基礎,而且組成不斷變化,因此帶來一些殊問題還不大,必須充分重視:
1.要注意溶劑的互溶性高產,不相混溶的溶劑不能用作梯度洗脫的流動相,有些溶劑在一定比例內混溶發揮作用,超出范圍就不互溶良好,使用時更要引起注意。當有機溶劑和緩沖液混合時銘記囑托,還可能析出鹽的晶體引領,尤其使用磷酸鹽時需別小心。
2.梯度洗脫所用的溶劑度要求更高示範,以保證良好的重現(xiàn)性應用前景。進行樣品分析前必須進行空白梯度洗脫,以辨認溶劑雜質峰運行好,因為弱溶劑中的雜質富集在色譜柱頭后會被強溶劑洗脫下來首次。用于梯度洗脫的溶劑需*脫氣,以防止混合時產生氣泡部署安排。
3.混合溶劑的粘度常隨組成而變化搖籃,因而在梯度洗脫時常出現(xiàn)壓力的變化技術。如甲醇和水粘主度都較小,當二者以相近比例混合時粘度增大很多推動,此時的柱壓大約是甲醇或水流動相時的兩倍相對較高。因此要注意防止梯度洗脫過程中壓力超過輸液泵或色譜柱能承受的大壓力。
4.每次梯度洗脫之后必須對色譜柱進行再生處理大面積,使其恢復到初始流動相流經(jīng)色譜柱積極參與,使固定相與初始流動相達到*平衡。
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